Речная рыба, как продукт питания, известна человечеству с незапамятных времен. Рыба, помимо мяса, овощей, зерна и фруктов составляла значительную долю в рационе древних людей, создававших поселения на берегах рек и озер. Наши предки веками изучали способы вылова и кулинарной обработки рыбы. И в наши дни, речная рыба является ценным источником питания современного человека, а в некоторых регионах России является чуть ли не единственным источником полноценного белка, полиненасыщенных жиров, витаминов и минералов [1,6].

Несмотря на большую пользу и ценность речной рыбы, как продукта питания, она может стать причиной заболеваемости человека серьезными гельминтозами. В нашей стране существует немалое количество возбудителей паразитарных заболеваний, способных заражать человека при употреблении в пищу рыбы и продуктов ее переработки. Одним из наиболее распространенных и опасных заболеваний на территории Российской Федерации является описторхоз [4].

Достоверно установлено, что на территории Западной Сибири, а именно в Обь – Иртышском бассейне, располагается один из крупнейших природных очагов с наивысшей интенсивностью циркуляции возбудителя описторхоза, где на протяжении многих веков, после включения человека в жизненный цикл паразита, сложилась наиболее напряженная эпизоотическая и эпидемиологическая ситуация [4]. Поэтому считаю тему работы актуальной.

Цель исследовательской работы: изучить зараженность личинками описторха рыб семейства карповых Обского бассейна закупленных в торговых сетях и у рыбаков.

Для достижения цели поставлены следующие задачи:

Изучить видовое разнообразие рыб семейства карповых Обского бассейна.

Рассмотреть биологию возбудителя описторхоза.

Провести паразитологическую оценку рыб семейства карповых.

4. Проверить гипотезу, что при заморозке личинки описторхов погибают.

Объект исследования: рыба семейства карповых.

Предмет исследования: заражённость рыб личинками оpisthorchis felineus.

Методы исследования:

1. Изучение научной литературы.

2. Паразитологический анализ рыбы семейства карповых.

3. Эксперимент по заморозке рыбы.

4. Анализ полученных результатов.

I.Теоретическая часть 1.1 Видовое разнообразие рыб семейства карповых Обского бассейна

Карповые — самое многочисленное семейство по числу видов. К карповым рыбам относятся: сазан, лещ, вобла, рыбец, карп, тарань, чехонь, карась, красноперка, толстолобик и др. В обском бассейне присутствуют основные представители этого семейства (см. Приложение 1 рис.1-5).

Сазан — крупная рыба (вес иногда достигает 16–22 кг). Эта рыба вкусная, жирная, особенно старые самцы. Из сазана выведен зеркальный карп, имеющий чешуйки особой формы. Его зачастую разводят в прудовых хозяйствах.

Лещ. Эта рыба имеет высокое, сильно сжатое с боков тело, небольшую голову. Мясо леща вкусное и жирное, у крупных лещей содержание жира достигает 5–8%, недостаток леща — большая костистость мяса. Длина рыб в уловах от 18 до 40 см.

Карп — культурная форма сазана. Это основной объект разведения в прудовых хозяйствах. Известны карп чешуйчатый, зеркальный

Чаще всего карп поступает в продажу как столовая товарная рыба от 0,25 до 1,0 кг, с жирностью мяса от 3 до 10%.

Карась — речной и озерный — покрыт золотистой или серебристой чешуей. Крупный карась имеет длину более 16 см, мелкий — 16 см и менее. Мясо сладковатое, иногда с илистым привкусом. Чаще карася используют для жарки.

Красноперка — рыба с тощим и костлявым мясом. Красноперка дальневосточная имеет довольно вкусное мясо, содержит 3–7% жира, каспийская несколько ниже по качеству, а красноперка остальных водоемов расценивается как мелочь [6].

1.2 Описторхоз, заболевание людей и животных

Описторхоз – паразитарное заболевание печени и желчевыводящих путей, вызываемое плоскими червями-сосальщиками. Заражение происходит при употреблении в пищу зараженной рыбы. Сосальщики или двуустки – плоские черви длиной 5-20 мм, шириной 1-4 мм. Яйца, выделяемые описторхисами, мелкие, до 0,026 х 0,01 мм [3]. (Приложение 2 рис. 6)

Сосальщики паразитируют в желчных протоках печени и протоках поджелудочной железы человека, домашних животных (кошки, собаки) и некоторых диких млекопитающих (лисы, норки, ондатры и др.). Яйца гельминтов с уже сформировавшимися личинками выделяются во внешнюю среду, и дальнейшее развитие происходит в пресных водоемах в моллюсках и затем в рыбах семейства карповых – плотва (вобла, чебак), язь, елец, красноперка, лещ, карась, линь и др [4].

После употребления в пищу зараженной рыбы личинки сосальщиков освобождаются в двенадцатиперстной кишке, откуда проникают в желчные протоки, где они в течение 3-4 недель достигают половой зрелости и начинают откладывать яйца. У 20-40% зараженных паразиты также обнаруживаются в протоках поджелудочной железы и в желчном пузыре [2].

Выраженные симптомы описторхоза развиваются обычно у лиц, приехавших в очаг из других районов, где описторхоз не встречается. У местного населения болезнь имеет, как правило, скрытое течение. В частности, острый описторхоз практически не наблюдается у коренных народностей Севера, пораженность которых хроническим описторхозом в некоторых очагах достигает 100%.

Инкубационный период в среднем 2-3 недели. Варианты течения ранней стадии разнообразны – от стертых форм до распространенных аллергических реакций с множественными поражениями. Стертая форма ограничивается небольшим повышением температуры, небольшим повышением эозинофилов в общем анализе крови. Болезнь начинается внезапно. Основные проявления в острой стадии – лихорадка и боли в правом подреберье. Лихорадка держится 1-3 недели с максимумом до 39С и выше.

Хроническая стадия описторхоза связана с жизнедеятельностью паразитов в желчных протоках печени и поджелудочной железы. Между этими органами имеется тесная взаимосвязь. Основным болезненным процессом является их воспаление [2,3].

Описторхоз проявляется преимущественно признаками хронического воспаления желчного пузыря, двенадцатиперстной кишки и поджелудочной железы. Ведущими проявлениями являются боли в верхней половине живота, преимущественно в правом подреберье, тошнота, плохая переносимость жирной пищи, сухость и горечь во рту и др. Часто при длительном течении развиваются депрессия с тревожно-ипохондрическим синдромом.

В ряде случаев течение болезни может быть тяжелым и сопровождаться закупоркой желчных протоков, развитием желтухи, абсцессов печени, желчного перитонита.

В диагностике описторхоза наибольшее распространение имеют рентгенологические методы, ультразвуковое исследование, компьютерная томография и др.

Паразитологическое подтверждение диагноза становится возможным на 4-й неделе после заражения, когда в содержимом двенадцатиперстной кишки и в фекалиях появляются яйца гельминтов. Имеющиеся в настоящее время иммунологические методы диагностики описторхоза недостаточно специфичны и чувствительны, их иногда целесообразно использовать лишь как дополнение к паразитологическим методам.

Паразитологическая диагностика, основанная на исследовании и выявлении яиц гельминтов в фекалиях и (или) в дуоденальном содержимом, является в настоящее время единственным средством подтверждения диагноза [2,3].

Лечение описторхоза должно быть комплексным. Химиотерапия проводится с помощью специальных противопаразитарных препаратов. Только под контролем врача.

Основой личной профилактики описторхоза является исключение из пищи необеззараженной рыбы. Обеззараживание достигается тепловой обработкой, замораживанием, копчением, солением в соответствии с разработанными рекомендациями.

Некоторые методы обработки рыбы, при которых происходит обеззараживание рыбы от паразитов:

замораживание; время замораживания 7 часов при температуре рыбы –40°С; 32 часа при –28°С.

соление – посол в растворе соли с плотностью тузлука с первого дня посола 1,20 при 2°С; продолжительность посола от 10 до 40 суток в зависимости от массы рыбы.

нагревание (варка); не менее 20 минут с момента закипания [1,6].

1.3 Характеристика и жизненный цикл O. Felineus

Возбудителями описторхоза являются печёночные сосальщики, в том числе Opisthorchis felineus (кошачья или сибирская двуустка), мелкий паразит ланцетовидной формы длиной 8-18 мм и шириной 1,2-2 мм. Развитие паразита происходит с участием двух промежуточных хозяев: моллюсков и карповых рыб. Конечными хозяевами являются человек и плотоядные животные. Первые промежуточные хозяева – пресноводные моллюски, обитающие в пересыхающих мелководных пойменных водоёмах. Их заражение происходит путём заглатывания яйца описторха, попадающих в водоём с фекалиями конечных хозяев, вместе с илом со дна водоёма. В теле моллюска паразит претерпевает метаморфоз. Эта стадия развития паразита длится в течение 2 месяцев. Образовавшиеся в результате церкарии покидают моллюска и активно внедряются в тело карповых рыб [2,5].

В теле рыбы паразит располагается в мышцах и подкожной клетчатке. Здесь он переходит к следующей стадии развития и превращается в метацеркарий, который лежит в округлой цисте серого цвета размером 0,17-0,21 мм. Личинка внутри очень подвижная. У освобождённого метацеркария хорошо видны две присоски и экскреторный пузырёк, заполненный чёрными гранулами. Через 6 недель после заражения рыбы паразит становится инвазионным, то есть способным заражать конечного хозяина.

Из всех жизненных стадий описторхиса только метацеркарий способен приживаться и размножаться в организме человека и хищных млекопитающих.

(Приложение 2. Рис. 7 Жизненный цикл Opisthorchis felineus)

Потенциальными носителями личинок описторхиса являются язь, елец, плотва, краснопёрка, лещ, линь, пескарь, гольян. В бассейне Оби наибольшая заражённость отмечается у язя, чуть меньшая — у ельца и плотвы [4,2].

Конечные хозяева паразитов (человек, кошки, собаки, лисицы, песцы, хорьки и другие плотоядные животные) заражаются после поедания инвазированной рыбы. В желудке и начальном отделе тонкого кишечника конечного хозяина метацеркарии освобождаются от цист, после чего проникают через жёлчные протоки в жёлчный пузырь и жёлчные ходы печени. Здесь они через 10-12 дней достигают половой зрелости и начинают откладывать яйца. Яйца паразита, попавшие на почву, погибают в течение 8-10 дней, при попадании же в воду сохраняют жизнеспособность до года. В теле конечного хозяина паразит может обитать в течение 10-20 лет.

II. Практическая часть 2.1. Материалы и методы

Для паразитологического исследования рыбы на наличие зараженности личинками описторхов были приобретены десять экземпляров рыб семейства карповых (карась, карп обыкновенный, карп зеркальный, чебак, краснопёрка) в торговых сетях города Новосибирска и отдельные виды у рыбаков. Все исследования проводились в лаборатории кафедры ветеринарно-санитарной экспертизы и паразитологии Факультета ветеринарной медицины Новосибирского ГАУ. (см. Приложение 3. Рис.8-9. Материал и оборудование для исследования).

Лаборатория располагается на первом этаже лабораторного корпуса, и состоит из двух кабинетов для сотрудников и для паразитарных исследований. Освещение лаборатории искусственное и естественное. Лаборатория оборудована вентиляцией поточного типа.

Боксы для паразитологических исследований укомплектованы лабораторными столами, и шкафами для хранения химических реактивов, пробирок, и другой лабораторной посуды. В наличии имеются два холодильника и одна морозильная камера для хранения образцов и паразитологического материала.

В экспериментальной работе использовала общепринятые в паразитологии методы исследований (компрессорный метод исследования), в том числе оборудование: лотки металлические, ножницы, пинцеты хирургические и анатомические, компрессориум на 24 среза, проекционный цифровой трихинеллоскоп Партнер.

Рабочие поверхности лабораторных столов дезинфицируются хлорамином, спиртом.

Инструменты и другая лабораторная посуда в течение дня складываются в емкости с дезинфицирующим раствором (10% хлорамин), затем обрабатываются кипячением.

Образцы биологического материала, после исследования обрабатываются хлорамином. Для отходов используют ведра с одноразовыми пакетами. После использования, емкости также дезинфицируют путем погружения их в дезраствор.

2.2. Паразитологическое исследование рыб семейства карповых

Основными методами паразитологического исследования рыбы является: компрессорный метод: так как личинки описторхид в большей степени локализуются в подкожной клетчатке и мышцах верхней части спины карповых рыб, исследуемый участок тела освободила от чешуи и ножницами делают два поперечных надреза от краев спинного плавника и один продольный, вдоль боковой линии. Кожу с обрезанного участка удалила пинцетом, и ножницами нарезала тонкие кусочки поверхностных мышц толщиной не более 2 мм или с рисовое зерно. Разместила их на стекле компрессориума, накрыла стеклом, крепко сдавила. Не менее 24 срезов просмотрела с помощью цифрового трихинеллоскопа на наличие метацекрарий трематод. При отсутствии личинок необходимо осмотреть срезы с двух сторон. Подсыхающие срезы увлажняла физиологическим раствором.

Инвазионные метацеркарии O. Felineus представляют собой цисту округлой (либо овальной) формы, окруженную двуслойной тонкой прозрачной соединительно – тканной оболочкой. Внутренняя оболочка по всему периметру равномерно прилегает к внешней. Личинка O. Felineus имеет две присоски – ротовую и брюшную. В задней части тела личинки расположен пузырь, заполненный темным зернистым содержимым, занимающий до 1/3 части тела. (Приложение 4 рис.10 Личинки метацеркариев Opisthorchis felineus). Под влиянием света лупы или микроскопа, личинка внутри цисты может совершать маятникообразные или переливающиеся движения.

2.3. Полученные результаты

При проведении паразитологического исследования образцов рыб семейства карповых получила следующие результаты. Из 10 исследованных образцов зараженность личинками O. Felineus имеют 8 рыб. 2 экземпляра не содержали метацеркариев. Вероятно это связано с тем, что они были приобретены в торговых сетях, а по правилам реализации речной рыбы, она должна быть выдержана при минусовых температурах. Такая рыба считается безопасной в паразитарном отношении и вероятность обнаружить личинки описторхов очень мала. (Приложение 5 рис. 11 Паразитологическое исследование рыбы).

Мною была выдвинута гипотеза, что при длительной заморозке личинки описторха погибают. Для её проверки было проведено ещё одно исследование. Поместив один экземпляр зараженной рыбы чебака в морозильную камеру на 30 дней, решила проверить, что станет с личинками паразитов после заморозки. Затем взяла образцы срезов кожи и мышц в замороженном экземпляре и обнаружила что паразитов нет. Под действием низкой температуры капсула метацеркария распадается и разлагается ферментами кожи и мышц. (Приложение 6). Значит, можно сделать заключение, что моя гипотеза подтвердилась.

III. Заключение

По результатам проделанной работы и проведенного исследования мною сделаны выводы:

1. По научным источникам информации изучила видовое разнообразие рыб семейства карповых Обского бассейна.

2. Рассмотрела биологию возбудителя описторхоза.

3. Провела паразитологическую оценку рыб и установила, что рыба, купленная в торговых сетях, не имеет метацеркариев описторха, рыба, приобретенная у рыбаков, была поражена личинками.

4. Подтвердила гипотезу, что при заморозке рыбы, личинки описторхов погибают.

Рекомендации по результатам исследования

По итогам исследования можно сделать практические предложения:

1. В связи с тем, что описторхоз на сегодняшний день является одним из распростанённых заболеваний среди населения нашего региона, а рыбный промысел семейства карповых популярен и население не всегда соблюдает режимы обеззараживания рыбы, что приводит к заражению, необходимо соблюдать санитарные нормы при приготовлении блюд из этой рыбы. При самостоятельном вылове обязательно подвергать рыбу термической обработке (высокие или низкие температуры), а потом проводить технологическую обработку (посол, сушка, копчение).

2. При проведении исследовательской работы я установила, что рыба, купленная в торговых сетях, не имеет метацеркариев описторха, рыба, приобретенная у рыбаков, была поражена личинками. На основании этого можно сделать практические предложение, что приобретать рыбу семейства карповых только в санкционированных местах торговли и торговых сетях.

Список литературных источников

Адиатулин И. Ф. Ветеринарно-санитарная экспертиза рыбы при описторхозе: дис. … канд. Вет. Наук. Москва, 2008. 148 с.

Белозеров, Е.С. Описторхоз / Е.С. Белозеров, Е.П. Шувалов. – Л.: Медицина, 1981. – 128 с.

Ильинских Е.Н. Актуальные вопросы изучения проблемы описторхоза в Сибири // Бюллетень сибирской медицины / Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск 2002, С. 63-70.

Соусь С. М. Паразиты рыб Новосибирской области: в 2 ч. Ч. 2. Опиторхоз, меторхоз, дифиллоботриоз. Профилактика / С. М. Соусь, А. А. Ростовцев / отв. Ред. О. Н. Бауер, А. И. Литвиненко. — Тюмень: Госрыбцентр, 2006.

Федоров, К. П. Описторхоз в Новосибирской области / К. П. Федоров, И. М. Зубарева // Актуальные проблемы инфектологии и паразитологии: материалы первой международной юбилейной конф. – Томск, 2001. – С. 135-136.

Шевченко В.В. Товароведение и экспертиза качества рыбы и рыбных товаров / В.В Шевченко // Спб., Питер, 2005. -256 с.

Приложение 1

Рыбы семейства карповые

Рис.1 Сазан обыкновенный